条斑紫菜多糖的提取纯化及其体外抗肿瘤活性研究.doc

梁桂宁++韦红巧++梁志锋

紫菜是在海中互生藻类的统称，属海产红藻，在我国沿海有大量养殖。紫菜多糖是从紫菜中提取的天然化合物。研究表明，紫菜多糖具有降血脂、抗凝血、抗氧化、及调节免疫等作用，但其降血脂的机制未见详述。本实验主要通过体外实验研究紫菜多糖对胆固醇微胶粒形成的影响，对紫菜多糖降血脂的机制做初步的探讨。

材料与方法

材料。（1）紫菜多糖的提取： 紫菜购自广西钦州海鲜批发市场。将紫菜烘干、剪碎。经酒精回流3h后阴干。阴干样品加水（样品与水的质量比为1：50） ，加热3h后收集提液。经浓缩、离心弃沉渣、Sevag 法脱蛋白后取上清液加入95%乙醇， 离心取沉淀， 冷冻干燥得粗多糖。（2）仪器与试剂：722N型分光光度计（上海精密科学仪器有限责任公司），胆固醇（成都科龙化工试剂厂）总胆固醇测定试剂盒（南京建成）。

实验方法。将50只1Oml离心管分为5组：胆汁组、胆固醇组、低剂量紫菜多糖组、中剂量紫菜多糖组及高剂量紫菜多糖组，每組10只。每只离心管内均加入0.06ml新鲜猪胆汁。除胆汁组外；其他各组均加入2.5mg胆固醇；其中低剂量紫菜多糖组、中剂量紫菜多糖组及高剂量紫菜多糖组分别加入10mg、20mg、40mg的紫菜多糖。待紫菜多糖与胆固醇和胆汁充分混合之后，加入5.0ml磷酸盐缓冲液（100mmol/L，pH=6.2），在38℃水浴振荡器中反应 1h，4000r/min离心 45min，小心倾去上清液，沉淀充分沥干。测定沉淀中游离胆固醇含量。以加入的总胆固醇量减去沉淀中游离胆固醇量，即为胆固醇微胶粒含量。

统计方法。采用SPSS17.0统计软件对结果进行统计分析，实验数据以均数± 标准差表示，计量资料单因素方差分析处理数据，以P<0.05为差异有统计学意义。

结果

结果显示：当离心管中加入胆固醇和胆汁时，有胆固醇微胶粒形成；而加入不同浓度金紫菜多糖时，可看到胆固醇微胶粒的形成减少（P<0.01），且成高剂量组少于低剂量组（P<0.05）。

讨论

高脂血症是由于脂质代谢紊乱或转运异常使血清或血浆中一种或多种脂质的水平高于正常的疾病，它是动脉粥样硬化、冠心病、胰腺炎等疾病的重要发病因素。随着人们生活水平的不断提高，高能高脂食物的大量摄入、饮酒量的增加以及运动量的减少致使高血脂症的发病率呈明显上升趋势，开发安全有效的降血脂药成为当前较为热门的研究课题。食物经胃肠道消化吸收是体内脂肪的重要来源。多种食物可以影响脂肪的消化吸收。高脂血症饮食疗法最新的研究成果进一步表明，通过饮食疗法，能使高脂血症患者获得满意的降脂效果。植物多糖对血脂的影响可通过增加脂肪的排泄、减少脂肪的消化吸收及影响血脂代谢等途径起到降血脂的作用。周慧萍等发现紫菜多糖可使进食高脂肪、高胆固醇的大鼠血清中的胆固醇及甘油三酯下降。在小肠黏膜上皮细胞的肠腔面存在着不动水层，部分脂肪及脂肪的分解产物是难溶于水的，它们不易透过不动水层到达小肠黏膜上皮细胞表面。肠道中脂肪、脂肪酸、胆固醇、脂溶性维生素等物质在胆盐作用下先形成具有水溶性的复合物（混合微胶粒），最后借助微胶粒进入肠粘膜细胞，从而促进脂类物质的吸收。本实验结果表明，紫菜多糖对此类微胶粒的形成起抑制作用，紫菜多糖可通过这一途径，减少脂类物质的吸收从而起降血脂的作用。

作者简介：

梁桂宁（1970-），男，广西武鸣人，副教授，硕士，研究方向：海洋药物生理学；韦红巧（1975-），女，广西宜州人，副教授，博士，研究方向：心脑血管疾病；梁志锋（1971-），男，广西武宣人，副教授，硕士，研究方向：疾病动物模型。