鸡组织中3种青霉素类药物残留检测的前处理方法比较研究.pdf

李克静 于静静 赵鑫 李淑娟

实验部分

试剂与仪器。Agilent 1200- 6410 QQQ液质联用仪；CAPCELL PAK C18 MGⅢ色谱柱；氮气吹干仪103199；PL303电子天平；KS501振荡器；VORTEX- 2GENIE涡旋混合器；CR21G高速冷冻离心机；固相萃取装置；Oasis HLB小柱；Milli- Q型超纯水仪；阿莫西林、氨苄西林、青霉素G、青霉素V、邻氯青霉素、双氯青霉素均购自德国Dr.公司；分析纯Na2PO4；分析纯亚铁氰化钾；乙酸锌；色谱纯正己烷；乙腈；实验用水为Milli- Q高纯水。

标准溶液的配制。精确称取上述标准物质各10.0 mg，用水：乙腈（1：9）溶解定容至10 mL，得到浓度为1000.0 μg/mL的标准储备液，- 18 ℃下避光保存；精确量取上述青霉素标准储备液各100μL，用色谱纯乙腈稀释至10mL，得到浓度为10.0 μg/mL的混合标准工作液，0～4℃下避光保存，使用时以10 %的乙腈水溶液稀释至所需浓度，现用现配。

高效液相色谱及质谱条件。

（1）色谱分离条件

色谱柱：C A P C E L L P A K C 1 8 MGⅢ（2.0*100 mm..id，3μm）；柱温：35℃；流动相：0.1%（v/v） 甲酸水溶液（A） 和乙腈（B）；进样量：10μL；梯度洗脱程序：0.0～1.0 min，保持10% B，1.0～4.0 min，10% B线性增至75%，4.1 min降至10% B并保持至8.0 min；流速：0.3 mL/min。

（2）质谱条件

电离模式：ESI+ ；毛细管电压：4000v；检测方式：多反应监测 （MRM）；干燥气温度：350 ℃，电喷雾压力：30psi，干燥气流量：9 L/min，倍增电压：300 EMV（+）。

结果与讨论

样品的提取与净化条件的选择。本文直接用磷酸盐溶液（pH=8.0）做提取液，不仅有利于近中性环境中水溶性青霉素类抗生素的提取，而且大大缩短了提取时间，简化了实验过程，有利于大批量样品的检测。

质谱条件的优化。在正离子扫描模式下，分别对1.0 mg/L各种药物的标准溶液进行母离子全扫描，确定各标准物质的分子离子[M+H]+，并优化各分子离子的毛细管出口电压。分别以选定的分子离子为母离子，进行相应的子离子全扫描，选择丰度较强的离子为定量离子，丰度次强的离子为定性离子，优化其碰撞能量。

方法的线性范围及检出限。6种青霉素类药物的质量浓度在5～100 μg/L的范围内线性关系良好，其相关系数（r）均大于0.9980，說明本方法适用于青霉素类药物的定量分析。采用空白样品中添加青霉素类抗生素的方法，分别以S/N≥3、S/N≥10确定检出限（LOD）和定量下线（LOQ）。

建立了同时测定鸡肉组织中6种青霉素抗生素残留的的高效液相色谱-串联质谱方法，该方法前处理简单，同时具有选择性好、灵敏度高等优点，且方法的回收率和重现性均能满足国内外兽药残留的检测要求，适用于实际样品的分析检测。